梯度高效液相色譜儀由兩種（或多種）不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例而改變流動相的極性、PH值或離子強度，使每個流出的組分都有合適的容量因子，并使樣品的所有組分在最短時間內實現最佳分離。
梯度高效液相色譜儀主要特點：
高效液相色譜法有“三高一廣一快”的特點：
1、高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
2、高效：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
3、高靈敏度：紫外檢測器可達0.01ng,進樣量在μL數量級。
4、應用范圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。
5、分析速度快、載液流速快：較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。
此外高效液相色譜還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。高效液相色譜的缺點是有“柱外效應”。在從進樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬，柱效率降低。高效液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。
