紫外分光光度法是根據物質的吸收光譜,來研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果
由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
紫外分光光度計用途
1.檢定物質
根據吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數ε是檢定物質的常用物理參數。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的大吸收波長和吸收系數載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。
2.與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質,則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,也可以和現成的標準譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準確,精密度高,且測定條件要相同。
3.比較大吸收波長吸收系數的一致性
4.純度檢驗
5.推測化合物的分子結構
6.氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產生氫鍵的強度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡合物組成及穩定常數的測定:
8.反應動力學研究
9.在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結構測定的科學,它是在有機化學和分析化學的基礎上發展起來的綜合性學科。